囊胚期胚胎二次冷冻复苏移植1例的出生命运和儿童发育情况随访

胚胎胚胎的冷藏存留是来完成喜殖应用(ART)治疗中会的关键组成部分，通过冷藏存留可以将患儿过多的胚胎胚胎存留下来，减小患儿的累积胎儿领军。胚胎胚胎的 冷藏存留可以在脊椎动物的若有收尾完成，如有的中会心地带原则上冷藏遗传物质期胚胎胚胎或卵裂期胚胎胚胎，现在随着培育造出经济体制的完善，更为多的IVF中会心地带完成卵子核培 养以期减小胎儿领军和减小多胎胎儿领军，因此深入研究者更是保守于完成卵子核冷藏存留。冷藏工具可以为程序 既有慢速冷藏，也可以为玻璃既有冷藏。我们中会心地带自 2004年起，对第3天复刻后的胚胎胚胎全部完成卵子核培育造出，如有卵子核产喜则完成玻璃既有冷藏存留。然而在临床工只用中会常存在一些偶发的意以外也许会，如患儿在蓬勃发展复刻日因诱发性也许无法完成胚胎胚胎复刻，只能将蓬勃发展的胚胎胚胎丢弃或便次冷藏后应于蓬勃发展复刻。但是我们无法确切卵子核二次玻璃既有冷藏后的确保性如何。目当年关于人类所胚胎胚胎二次冷藏的史料较少，尽管有史料媒体报道了一些传染病必须在胚胎胚胎二次冷藏蓬勃发展复刻后授予活产，但这些媒体报道多为第一次冷藏为遗传物质 期胚胎胚胎或卵裂期胚胎胚胎，蓬勃发展后培育造出至卵子核便次冷藏[1。4]。Kumasako等[3]看来二次冷藏不也许会减小胚 胎的栽植领军，但是关于卵子核冷藏蓬勃发展后便次冷藏复 苏复刻的媒体报道极少。且据我们所知，已为无深入研究来分 析卵子核二次玻璃既有冷藏蓬勃发展复刻后的造出喜整部。在 此传染病媒体报道中会，我们描述了卵子核二次冷藏蓬勃发展复刻 后早产的造出喜整部，并严厉批评患儿的兄弟姐妹完成长年 随访仔细观察，具体历史纪录了此成年人的身材胚胎也许会。一、临床资料患儿34岁，太太35岁，因十二指肠因素原发不曾婚 到我院喜殖中会心地带就诊，不曾婚年限6年。根据全球卫 喜的组织标准，男方数值较长时间。患儿2005年在本 中会心地带完成睾丸刺激后**，在**天数所选用的促 排卵方案按照本中会心地带的原则上完成，在上一天数的黄 体期开始应用促性腺激素释放激素拮抗剂(GnRH-a)，当垂体翻倍降抑制后，用卵泡刺激素(FSH，果纳芬，默克)完成睾丸刺激。当主导卵泡直径翻倍18～ 20 rnlTl时，注射人绒毛膜促性腺激素(HCG，艾泽，默克)，38 h后完成超声引导的卵泡穿刺来借助卵子核。合计授予13枚卵子核，完成原则上无性喜殖后， 13枚卵子核受精卵，在受精卵后第3天仔细观察胚胎胚胎的卵裂也许会，挑选2枚优质胚胎胚胎完成复刻。复刻后剩余的 11枚卵裂期胚胎胚胎经患儿知情同意后全部完成卵子核培育造出，在受精卵后第5日或第6日分别仔细观察卵子核产喜也许会及基本上。选用Gardner评分系统对卵子核完成评分，该患儿合计产喜2枚卵子核，卵子核评分分别为4BB和4BC。将所产喜的卵子核按照我中会心地带原则上工具[5]完成玻璃既有冷藏，具体操为：卵子核冷藏当年完成人工皱缩，即用激光 系统在所处内细胞核团的滋养细胞核连接薄弱处打孔，让囊腔液的水，使细胞核皱缩成团；然后将卵子核装入含有7．5％DMSO和7．5％乙二醇的预连续性液中会连续性 2 min，最后移入玻璃既有冷藏液中会连续性30 s，将胚胎胚胎转 移至冷藏外环(cryoloop外环)上，直接灌入液氮存留。 患儿的食品天数复刻不曾授予胎儿，**3个月后患 者完成冷藏卵子核蓬勃发展复刻。人工天数准备肾脏，更年期 第2"-4天讫原则上B超检查，予以胺类尿酸(补佳乐，先灵，德国)制剂，制剂剂量根据患儿先前的肾脏也许会 调整(2～18 rag／d)。B超监测肾脏喜长也许会，当肾脏厚 度翻倍8 ITlln时肌肉注射黄体酮(20 rng×2 d，40 mgX 2 d，20--一40 mg×1 d)，注射后第6天讫卵子核蓬勃发展复刻。复刻当年1 d按照我中会心地带原则上工具[5]完成卵子核蓬勃发展：准备卵子核蓬勃发展液，在胚胎胚胎培育造出皿内配制0．33 mol／L、0．2 mol／L麦芽糖溶液和为基础培育造出液(GMoPS Plus， Vitrolife，瑞典)，从液氮中会取造出隐含卵子核的冷藏外环，氧气 中会停留5 S后，将胚胎胚胎依序灌入上述蓬勃发展液中会，时间分 别为2 min、3 min和5 min。蓬勃发展后的2枚卵子核仅完成 激光来完成孵既有，选项在所处细胞核团的半透明带上部位切割半透明带的1／4左右。最后将卵子核移人提当年准备好的 卵子核培育造出液(G2，ⅥnDlife，瑞典)中会，放在37℃、6％OQ 和5％Q培育造出箱内培育造出16 h。复刻当年仔细观察卵子核的拓展 和孵造出也许会。 该患儿在卵子核蓬勃发展复刻日诱发急性阑尾炎只能 完成卵子核复刻，在患儿知情同意的当年提下便次按照上述卵子核玻璃既有冷藏操只用步骤完成胚胎胚胎冷藏。患儿在手 术6个月后便次完成冷藏卵子核蓬勃发展复刻，具体操只用步骤同上，卵子核蓬勃发展后16 h完成复刻，患儿成功胎儿，并于孕38周受孕一健和文女婴，体长52 CITI，运动所量3 550 g。 由于这是本中会心地带第1则有卵子核二次冷藏的患儿，所以我们对其女完成了长年的随访。兄弟姐妹的父亲体重为 185 cm，母亲体重为167 cm兄弟姐妹1岁时，体重83 cm， 运动所量12 kg；3岁时，体重97cm，运动所量21kg，身体健 和文，无病因；5岁时，体重117 cm，运动所量31 kg；7岁时，体重135cm，运动所量40 kg；9岁时体重154cm，运动所量50 kg；12岁时，体重168 cm，运动所量62 kg；10岁时，造出现胚胎；12岁时更年期初潮。该女人性格开朗，参与学校管乐队、校篮球队等自发娱乐活动，并得到不太好的成绩，其常人较长时间，学习成绩在全校当年5名。二、提问在此传染病中会，患儿授予13枚开花结果卵子核，13枚卵子核受精卵，经过培育造出后产喜2枚卵子核并玻璃 既有冷藏存留。患儿在原计划卵子核蓬勃发展复刻日诱发急性阑尾炎，在其知情同意的当年提下将蓬勃发展后的卵子核便次冷藏存留。此为临床工只用中会一些难以避免的也许会。如果将患儿胚胎胚胎丢弃极其好在，而胚胎胚胎便次冷藏存留 的确保性已为有异确。到目当年为止，虽然已经有一些胚 胎在二次冷藏后授予活产的传染病媒体报道，但都是第一次 胚胎胚胎冷藏时为遗传物质期或卵裂期胚胎胚胎，蓬勃发展后培育造出至卵子核收尾便次冷藏。本深入研究是首次对卵子核二次玻璃既有 冷藏后授予的活产完成长年随访的传染病媒体报道。 有学者曾经用小鼠胚胎胚胎深入研究重复冷藏蓬勃发展对胚胎胚胎的影放，他们发掘造出与不曾冷藏的胚胎胚胎相比，冷藏胚胎胚胎 在孵造出时的细胞核数稍少，且小鼠胚胎胚胎必须在成功的 重复冷藏蓬勃发展3次后仍然具有体以外胚胎能力也[6]。在此传染病中会，我们对比了两次冷藏当年后卵子核的基本上学变既有，第1次冷藏是在第5天，卵子核为4期，质量为 4BB，第一次蓬勃发展后培育造出16 h，卵子核几乎孵造出，成 6期卵子核，质量为6BB；第2次冷藏蓬勃发展后，培育造出16 h 卵子核质量为6BB。卵子核基本上从以外观上看，两次冷藏后 无法差可称性，卵子核细胞核幸存良好，有如卵子核收尾胚胎胚胎的 二次玻璃既有冷藏对胚胎胚胎的胚胎无太大影放。分析原 因，我们看来也许与以下几个全面性有关。首先，卵子核在冷藏之当年完成了激光皱缩，将卵子核腔内液全部放 造出，使卵子核腔塌陷，待卵子核几乎皱缩后便完成卵子核的 玻璃既有冷藏，这样必须减少冷藏流程中会微粒的产喜， 减小对胚胎胚胎的重击。有深入研究也证实卵子核的人工皱缩 必须有效减小卵子核冷藏后蓬勃发展的幸存领军[7-9]。而且冷藏卵子核蓬勃发展后的来完成孵既有也极其关键，在胚胎胚胎冷藏流程中会，人类所卵子核的半透明带渗出，也许会限制胚胎胚胎的向以外孵 造出，有深入研究看来卵子核在拓展流程中会慢慢地膨胀皱缩， 如果在半透明带造出口处坎的次数多了，卵子核就也许会衰亡[10]。而且，冷藏蓬勃发展后的卵子核，由于刚刚蓬勃发展后囊 胚腔还西北面皱缩稳定状态，胚胎胚胎和半透明带中会间的很窄相比 大于卵裂期胚胎胚胎的很窄，因此卵子核的来完成孵既有更是确保。我们的统计数据发掘造出，不曾经过来完成孵既有的卵子核，蓬勃发展后过夜培育造出，几乎孵造出的比则有(340A)更远小于激光孵既有后的卵子核(85％)，更是高的孵造出比则有意味着更是高的着床 机也许会。其次，卵子核的冷藏存留不同于卵裂期胚胎胚胎，它 自身有很多优点。必须胚胎至卵子核收尾的胚胎胚胎经过 二次选项，胚胎能力也可称常的胚胎胚胎已经被淘汰；卵子核的 细胞核数目多，更是是滋养细胞核层细胞核，重击后整修能力也强，少数细胞核生还后对脊椎动物能力也影放小；卵子核 的细胞核更是小，呈梭形，表面积／体积比大，对脱水、复水造成了的体积变既有耐受性更是佳[11]。因此我们猜测卵子核 二次冷藏后细胞核无法重击的也许也许与此有关。 目当年虽然有一些胚胎胚胎二次冷藏授予活产的报 道，但是对早产长年随访的媒体报道极其鲜见。在此传染病中会，卵子核经过二次玻璃既有冷藏后，仍然必须成功 栽植，患儿在足月受孕一较长时间运动所量的早产，也若有 卵子核二次冷藏似乎极为影放早产的造出喜整部。复习史料，我们发掘造出在2011年的一项小型深入研究中会，只用 者分析了一次冷藏和二次冷藏后胚胎胚胎造出喜整部的差 可称[12]。在文中会一次冷藏，就是将2PN期或卵裂期的胚胎胚胎完成冷藏存留，蓬勃发展后复刻；二次冷藏指的是 冷藏的胚胎胚胎蓬勃发展后完成体以外培育造出至卵子核收尾，便进 讫冷藏。结果若有二次冷藏组的双胎领军小于一次冷藏组，他们看来是二次冷藏组复刻的胚胎胚胎数较少造 成的。此深入研究还若有二次冷藏组的造出喜运动所量稍高于 一次冷藏组，尽管无法观念学差可称性；在二次冷藏组不曾 发喜非同可称常，在一次冷藏组发喜1则有非同可称常；两 组仅不曾发喜死胎或早产生还。尽管这些并非卵子核 二次冷藏的深入研究，但从一定程度上反映了胚胎胚胎在二 次冷藏后极为影放早产的造出喜整部。我们严厉批评新 喜儿随访至9岁，该成年人身材胚胎较长时间，常人胚胎时是 常，人际关系胚胎较长时间。与之当年冻融胚胎胚胎复刻(FET)造出 喜成年人的随访推论恰当[13,7]。Pelkonen等分析 了FET造出喜兄弟姐妹的非同可称常的发喜也许会，看来 FET造出喜兄弟姐妹发喜非同可称常的比则有与的食品复刻相同，最后Pelkonen等[14]对FET后代兄弟姐妹完成了一 项随访3年的深入研究，发掘造出FET与的食品复刻造出喜后代 的身材胚胎是相同的。还有深入研究发掘造出ART后造出喜 后代的大脑运动所胚胎全面性与自然胎儿后代无显著差 可称，看来他们的大脑胚胎、社也许会亲密关系及语言学习并无 差可称性[117]。可见胚胎胚胎冷藏对早产长年胚胎的影 放与的食品复刻胚胎胚胎相同。而从我们的传染病媒体报道来 看，卵子核的二次冷藏也是相对确保的。 我们将卵子核二次玻璃既有冷藏后的胚胎胚胎完成复刻 后授予成功胎儿，足月受孕一健和文女婴，并完成长达12年的随访，此成年人身材胚胎较长时间，常人胚胎较长时间，人际关系胚胎较长时间。看来此卵子核二次冷藏后胚胎胚胎仍然具有不太好的栽植期望和胚胎期望。但此传染病仅为个则有媒体报道，卵子核重复冷藏是否也许会造成了胚胎胚胎的重击仍有异 确，复刻重复冷藏的胚胎胚胎是否确保还需要进一步的深入研究，因此在临床工只用中会，我们仍应尽也许避免胚胎胚胎的重复冻融。参考史料稍。原始造出处：王雪，甄绿然，孙时是怡，郁琦等，卵子核期胚胎胚胎二次冷藏蓬勃发展复刻1则有的造出喜整部和成年人胚胎也许会随访[J],喜殖华尔街日报，2018,27(12).